Medidor de estándar enzimático de longitud de onda completa PTEs un instrumento de análisis de alta precisión que integra una variedad de modos de detección, como la absorción de luz ultravioleta - visible, la fluorescencia y la quimioluminiscencia, y es ampliamente utilizado en Ciencias de la vida, diagnóstico clínico, investigación y desarrollo de medicamentos y seguridad alimentaria. Su ventaja central radica en la amplia cobertura de longitud de onda (generalmente 190 - 1000 nm) y la capacidad de detección multifuncional, que puede satisfacer las diversas necesidades, desde la investigación científica básica hasta la producción industrial. Se basa en la Ley de absorción de luz (ley Bill - lambert), que emite luz de longitud de onda específica a través de una fuente de luz. después de la absorción de la muestra, el detector mide la intensidad de la luz residual y calcula la absorción (a) para determinar la concentración de la molécula objetivo.

　　Medidor de estándar enzimático de longitud de onda completa PTLa operación debe combinarse con las necesidades experimentales (como el modo de detección, el tipo de muestra) para la configuración de parámetros y el control del proceso. los pasos centrales incluyen "preparación - configuración - detección - procesamiento de datos". el siguiente es el proceso de operación general:

I. preparación previa a la operación

Preparación de muestras y reactivos

Asegúrese de que las muestras a detectar (como la placa elisa, la solución de ácido nucleico, la suspensión celular, etc.) se hayan procesado de acuerdo con el plan experimental, y que no haya burbujas en la placa microporosa, gotas colgantes en la pared (si hay burbujas, se puede golpear suavemente la pared para eliminarlas; las gotas colgantes en la pared deben secarse con toallas de papel).

Preparar controles en blanco, productos estándar y productos de control de calidad, dispuestos en microporos de acuerdo con el diseño preestablecido (se recomienda registrar el diseño de los agujeros para evitar confusión).

Inspección de instrumentos y medio ambiente

Confirme que el cable de alimentación del medidor de enzima está conectado normalmente, verifique si la Sala de muestras está limpia (sin polvo, residuos líquidos) antes de arrancar y limpie con un paño sin polvo si es necesario.

Si el experimento requiere un control de temperatura (como la incubación a 37 ° c) o un shock, confirme con antelación que las funciones relacionadas con el instrumento son normales (como si el módulo de control de temperatura puede alcanzar la temperatura establecida).

Abra la fuente de alimentación de la computadora y el medidor de enzima, inicie el software de operación de apoyo y espere a que se complete el autoexamen del instrumento (generalmente se muestra el Estado "listo").

2. configuración del método de detección

Selección del modo de detección

Seleccione el modo de detección correspondiente en el software de acuerdo con el tipo de experimento:

Detección de luz absorbente (como elisa, cuantificación de ácidos nucleicos): es necesario establecer la longitud de onda de detección (como la longitud de onda principal de 450 nm, la longitud de onda de referencia de 630 nm) y el ancho de banda (1 - 5 nm por defecto).

Detección por fluorescencia: es necesario establecer la longitud de onda de excitación (por ejemplo, 485 nm), la longitud de onda de emisión (por ejemplo, 535 nm) y seleccionar la lectura superior / inferior (las muestras líquidas suelen elegir la parte superior, y los cultivos celulares pueden elegir la parte inferior).

Detección de quimioluminiscencia: sin necesidad de establecer la longitud de onda, elija directamente el modo "quimioluminiscencia" y preste atención a apagar la fuente de luz de la Cámara de muestra para reducir la interferencia.

Detección dinámica: es necesario establecer un intervalo de detección adicional (por ejemplo, leer cada 10 segundos), la duración total de la detección (por ejemplo, 30 minutos) y activar el control de temperatura (si se necesita una reacción a temperatura constante).

Establecer parámetros de microporos

Elija las especificaciones de la placa microporosa (por ejemplo, 96 placas de agujero, 384 placas de agujero) y defina el alcance de la detección (por ejemplo, "detección de placa completa" o especifique una posición de agujero específica, como A1 - h12).

Si es necesario descartar el efecto de borde o parte de la posición del agujero, se puede marcar el agujero "no detectado" en el software.

Configuración de la función auxiliar

Control de temperatura: si la reacción requiere una temperatura constante (por ejemplo, la reacción enzimática es de 37 ° c), establezca la temperatura objetivo (el error suele ser de ± 0,1 ° c) y espere a que el instrumento se precaliente a la temperatura establecida.

Choque: cuando es necesario mezclar la muestra antes de la detección, establezca el modo de choque (como choque lineal), la velocidad de rotación (como 500rpm) y el tiempo (como 10 segundos).

Corrección de la longitud de onda de referencia (detección de luz absorbida): abre la "detección de doble longitud de onda" para mejorar la precisión de los datos deduciendo la interferencia de fondo (como arañazos de microporos y burbujas) a través de la longitud de onda de referencia (como 630 nm).

III. detección de muestras

Placa microporosa cargada

Coloque suavemente la placa microporosa en la bandeja de la Cámara de muestra, asegúrese de que el borde de la placa esté alineado con la ranura de posicionamiento de la bandeja (evite errores de lectura causados por el desplazamiento de posición) y cierre la puerta de la Cámara de muestra.

Iniciar la detección

Haga clic en "iniciar la detección" en el software, el instrumento se ejecuta automáticamente de acuerdo con el método preestablecido, y la pantalla muestra el progreso de la detección en tiempo real (como el agujero completado, la lectura actual).

Evite tocar el instrumento o abrir la puerta de la Sala de muestras durante la prueba para evitar interferir con la estabilidad del camino óptico.

IV. procesamiento y exportación de datos

Ver resultados en tiempo real

Una vez completada la prueba, el software genera automáticamente los datos originales (como el valor de absorción, la intensidad de fluorescencia) y los muestra en forma de tabla o gráfico térmico.

Se pueden ver datos de un solo agujero, valores medios (como la media de los agujeros repetidos del estándar) o generar curvas estándar (si se establece la concentración del estándar).

Análisis de datos

El procesamiento de datos se realiza de acuerdo con las necesidades experimentales:

Análisis cuantitativo (como elisa): el software calcula automáticamente la concentración de muestras desconocidas ajustando la curva estándar (lineal, ajuste de cuatro parámetros, etc.) a través de la concentración estándar y el valor de señal correspondiente.

Cálculo de la relación (como la pureza del ácido nucleico): la relación 260 / 280 nm y 260 / 230 nm se calcula automáticamente en la detección de luz absorbente para evaluar la pureza de la muestra.

Curva dinámica: se genera la curva "valor de señal - tiempo", que puede calcular la velocidad de reacción, la semivida y otros parámetros.

Exportación y conservación de datos

Guarde los datos en el formato predeterminado del software (como. csv,. txt), o exporte a formato microsoft, PDF para la redacción del informe.

Se recomienda guardar la plantilla del método de detección al mismo tiempo (el mismo experimento se puede llamar directamente la próxima vez, sin necesidad de repetir la configuración).

V. Organización después de la operación

Cerrar el instrumento

Después de completar la prueba, retire la placa microporosa y limpie la Cámara de muestras (si hay fugas de líquido, debe limpiarse a tiempo).

Apague el software del medidor de enzima, la fuente de alimentación del instrumento y la fuente de alimentación de la computadora a su vez.

Registro y limpieza

Registrar la información experimental (como la fecha de detección, el modelo del instrumento y los parámetros del método) para facilitar la trazabilidad de los datos.

Limpie regularmente la Sala de muestras y la bandeja (limpie con 75% de alcohol para evitar residuos de reactivos corrosivos) y cubra la cubierta de polvo cuando no la use durante mucho tiempo.