El microscopio electrónico de barrido (sem) toma imágenes de la interacción entre el haz de electrones y la muestra, lo que requiere una alta conductividad eléctrica, planitud de la superficie y limpieza de la muestra. Los diferentes materiales deben ser tratados de manera específica, y los siguientes proporcionan habilidades prácticas desde tres aspectos: muestras metálicas, no metálicas y biológicas.
Muestras metálicas: la conductividad eléctrica y la limpieza de la superficie son claves
Las muestras metálicas tienen una buena conductividad eléctrica, pero la oxidación o contaminación de la superficie puede interferir con la imagen. Pasos de procesamiento:
Corte y incrustación: para muestras metálicas grandes, se cortan en trozos pequeños con corte de alambre o rueda de molienda para facilitar la observación; Los metales frágiles (como los metales cerámicos) deben fijarse con incrustaciones en frío (como la resina epoxi).
Pulido mecánico: molienda gruesa con papel de arena (400 a 2000), y luego arrojándolo al espejo con alúmina o pasta de pulido de diamante para reducir los arañazos superficiales.
Limpieza: limpieza por ultrasonido durante 5 - 10 minutos, eliminar los residuos de pulido y luego deshidratar con etanol o cetona para evitar la oxidación.
Tratamiento de conducción eléctrica (opcional): si la conductividad eléctrica de la muestra es pobre (como el acero de alto carbono), se puede recubrir una fina capa de oro (5 - 10 nm) o película de carbono para mejorar la recepción de la señal.
Muestras no metálicas: mejora de la conductividad y estabilidad
La mala conductividad eléctrica de los no metales (como cerámica y polímeros) requiere centrarse en resolver el efecto de carga. Habilidades de procesamiento:
Recubrimiento: recubrimiento en aerosol de oro, platino o capa de carbono en la superficie (espesor de 2 - 20 nm) para formar una vía de conducción eléctrica.
Tratamiento de secado: las muestras de Biopolímeros requieren deshidratación por gradiente (serie de etanol o cetona), y luego secado en punto crítico (secador supercrítico de co2) para evitar la contracción y la deformación.
Conductividad eléctrica superficial: para materiales porosos (como el carbón activado), se puede impregnar el pegamento conductor o la pulpa de plata para llenar los poros.
Muestras biológicas: mantener el equilibrio entre la estructura y la conductividad eléctrica
Las muestras biológicas (como células y tejidos) deben tener en cuenta la conservación morfológica y la conductividad eléctrica. Pasos básicos:
Fijación: fijar la estructura celular con glioxal o formaldehído para evitar la deformación durante la observación.
Deshidratación: deshidratación gradiente de etanol o cetona (30% - 100%), 10 - 15 minutos por paso.
Secado en punto crítico: evitar el colapso estructural causado por la tensión superficial y conservar la morfología tridimensional de la célula.
Recubrimiento: pulverización de una fina capa de oro o platino (2 - 5 nm) para reducir el efecto de carga, manteniendo al mismo tiempo los detalles de la superficie.
Recomendación general: todas las muestras deben secarse con nitrógeno de alta pureza después de la preparación para evitar manchas de agua; Asegúrese de que la superficie de la muestra esté limpia antes del recubrimiento, de lo contrario el recubrimiento desigual afectará la calidad de la imagen. A través del procesamiento específico, la resolución de la imagen SEM se puede mejorar significativamente y proporcionar datos confiables para el análisis de materiales y la investigación biológica.