La etapa anterior tardó mucho tiempo en explorar el método de construcción de BBB in vitro, probó tres placas transwell, probó 2 - 3 resistencias celulares y también cambió las células de diferentes grupos de Investigación. el esfuerzo fue suficiente para las personas interesadas, y finalmente la construcción exitosa obtuvo los resultados deseados. Al principio, también obtuve mucha inspiración en el pequeño libro rojo en la etapa de exploración, y también agradeció a los amigos que ayudaron y no dudaron en enseñar, por lo que resumieron algunas experiencias y las compartieron, con la esperanza de que los amigos tomaran menos desvíos.

¡1. ¡ el Estado celular es muy importante! Asegúrese de esperar a que las células estén en buen estado antes de plantar la placa, extender 5w células sobre la membrana de los pequeños agujeros de la Cámara superior, la placa de semilla debe ser uniforme, la cámara superior debe terminar de cultivar 100 - 200 μl y la Cámara inferior debe terminar de cultivar 600 - 800 μl.

¡2. ¡ no contamines! Debido a que la placa de transwell es más compleja y tiene muchos procesos, siempre hay que prestar atención a la desinfección. Después de plantar la placa, no hay necesidad de observar bajo el espejo todo el tiempo; Utilizando la Sala de detección del medidor de resistencia, se debe prestar más atención a no contaminar.

3. elija la placa de transwell adecuada para determinar cuántos agujeros necesita para saber cuántas células plantar. Si es necesario observar el Estado celular bajo el microscopio, se debe usar una película PET (transparente). Probé la selección / Corning / jiete por primera vez, y finalmente elegí la placa de agujero de jiete.

¡4. ¡ elija un medidor de resistencia celular estable y fácil de usar!!! Esta es la máxima prioridad, como el medidor de resistencia de milibo, que es un electrodo de palillos, que se sacude fácilmente si se sostiene a mano, lo que resulta en valores inestables. Elegí el medidor de resistencia de voltaje epitelial re1600 de Beijing Metallurgical engineering, que se puede colocar sin problemas en la placa del agujero, y el valor es súper estable al detectar.

5. en cuanto al tiempo de formación del bbb, la duración de cada construcción del BBB debe variar según el Estado celular, para garantizar la formación de una sola célula (la resistencia celular alcanza el período de plataforma estable), y luego realizar el siguiente experimento.

Origen citado en el artículo: construcción de un modelo de barrera hematoencefálica in vitro - grandes logros se han convertido - xiaohongshu (xiaohongshu.com)