Productos estándarEs la sustancia de referencia central para el análisis cuantitativo de laboratorio y la verificación de métodos, y la normalización de su preparación y dilución determina directamente la precisión de los resultados de las pruebas. Este artículo ordena un conjunto de precauciones de operación fáciles de entender y directamente aterrizables para ayudar a los experimentadores a evitar errores comunes y garantizar que los datos experimentales sean confiables.
I. precauciones para la preparación antes de la preparación
Pretratamiento de productos estándar
Equilibrio a temperatura ambiente: los estándares extraídos del ambiente refrigerado / congelado deben colocarse a temperatura ambiente durante 30 a 60 minutos para que coincidan con la temperatura ambiente del laboratorio y eviten la absorción de humedad o errores de volumen al pesar debido a diferencias de temperatura.
Kaifeng y embalaje: los productos estándar abiertos por primera vez deben empacarse de acuerdo con el uso mínimo para evitar la congelación y descongelación repetidas (especialmente los productos estándar biológicos); Al empaquetar, use un tubo centrífuga desechable estéril y libre de enzimas, y haga un buen trabajo de etiquetado (nombre, concentración, fecha de empaquetado, fecha de caducidad).
Confirmación de pureza: verifique el certificado de producto estándar antes de su uso para confirmar su pureza, humedad, contenido de impurezas y otros indicadores. si se trata de un producto estándar que contiene agua cristalina, debe incluir la proporción de agua cristalina al calcular la concentración de preparación para evitar desviaciones de concentración.
Preparación y calibración de aparatos
Selección de la herramienta de medición: seleccione el instrumento de precisión adecuada de acuerdo con el volumen de preparación, como preparar una pistola de pipeta / pipeta para solución inferior a 10 ml (precisión de nivel a) y un matraz aforo para solución superior a 100 ml; Está estrictamente prohibido utilizar cilindros de medición ordinarios para la preparación precisa.
Limpieza de utensilios: todos los utensilios que entran en contacto con los estándares deben limpiarse más de tres veces con agua ultrapura, y los estándares orgánicos también deben lavarse con los disolventes orgánicos correspondientes para evitar la contaminación de los estándares por impurezas residuales.
Verificación de calibración: calibrar regularmente la pistola de transferencia de líquido, el cilindro aforo y otros utensilios para garantizar que su error esté dentro del rango permitido, y el registro de calibración debe conservarse para referencia.
Selección y tratamiento de disolventes
Coincidir con las características del estándar: el estándar soluble en agua se prepara prioritariamente con agua ultrapura (resistencia ≥ 18,2mohm · cm); Los estándares liposolubles deben seleccionar los disolventes orgánicos correspondientes (como metanol, nitrilo, n - hexano), y los disolventes deben ser de pureza cromatográfica o superior a la pureza analítica.
Pretratamiento del disolvente: los disolventes volátiles deben operar en un Gabinete de ventilación para evitar que la volatilización del disolvente afecte la concentración; El disolvente que contiene el sistema de amortiguación debe ajustar el pH al rango requerido con antelación y ahora se utiliza para evitar que la capacidad de amortiguación falle.
2. precauciones para la operación de pesaje y capacidad fija
Enlace de pesaje
Selección de la balanza: seleccione la balanza de precisión correspondiente de acuerdo con el rango de pesaje de la norma, como la balanza de análisis de una centésima parte de la norma de miligramos, y la balanza de una décima parte de la norma de gramos.
Prevención de la absorción de humedad y prevención de la volatilización: los productos estándar fáciles de absorber la humedad deben pesarse rápidamente en el secador; Los estándares líquidos volátiles deben sellar la botella de pesaje con una película de sellado para reducir la pérdida de volatilización.
Pesaje paralelo: se recomienda realizar dos pesas paralelas. si la desviación de los resultados de las dos veces supera el 0,5%, es necesario volver a pesarlo para garantizar que los datos de pesaje sean precisos.
Enlace de capacidad fija
Disolución completa: después de transferir el estándar bien pesado al matraz aforado, añadir una pequeña cantidad de disolvente para agitar completamente o ultrasonido para garantizar que el estándar esté completamente disuelto y no haya partículas visibles a simple vista; Los estándares biológicos (como proteínas y ácidos nucleicos) deben invertirse suavemente y mezclarse para evitar choques violentos que causen fallos de actividad.
Precisión de la capacidad fija: después de que la temperatura de la solución sea la misma que la temperatura ambiente, agregue lentamente el disolvente a la escala del matraz aforado, y agregue gota por gota con un gotero de cabeza de Goma cuando se acerque a la escala para garantizar que la superficie cóncava esté plana con la escala; Después de fijar el volumen, invierta el Matraz aforado de 10 a 15 veces para que la solución se mezcle completamente.
III. precauciones básicas en el proceso de dilución
Selección del gradiente de dilución
Las reservas estándar de alta concentración deben diluirse paso a paso para evitar errores de concentración causados por la dilución directa, como diluir primero la reserva de 1000 μg / ML a 100 μg / ml de líquido intermedio y luego diluirla a 10 μg / ml de líquido de trabajo.
El múltiplo de dilución no debe ser demasiado grande, se recomienda que el múltiplo de dilución única no supere los 100 veces, si se necesita una solución estándar de concentración extremadamente baja, se puede diluir en múltiples múltiplos pequeños.
Detalles de la operación de dilución
Al retirar la reserva, la cabeza de la pistola de extracción de líquido debe lavarse de 2 a 3 veces para reducir la pérdida de la pared colgante; Después de la transferencia, es necesario lavar la pared interior de la pipeta con un disolvente para asegurarse de que todo se transfiera al recipiente de dilución.
Durante el proceso de dilución, es necesario mezclar suavemente mientras se agrega un disolvente, especialmente una solución estándar pegajosa o fácil de estratificar, para evitar concentraciones locales desiguales.
Verificación de estabilidad después de la dilución
La estabilidad de la solución de trabajo de algunos productos estándar (como los estándares de vitaminas y residuos de plaguicidas) es pobre, por lo que es necesario distribuirlos ahora; Si se necesita conservación a corto plazo, se debe almacenar en las condiciones especificadas en el certificado y verificar su apariencia (sin turbidez, precipitación, decoloración) antes de su uso.
IV. precauciones de almacenamiento y registro después de la preparación
Condiciones de almacenamiento
Almacenar de acuerdo con los requisitos del certificado de producto estándar, como los productos estándar biológicos deben ser congelados a - 20 ℃, los productos estándar orgánicos pueden ser refrigerados y protegidos de la luz; Los contenedores de almacenamiento deben sellarse para evitar la adsorción causada por el contacto con tapones de Goma y otros materiales.
Se recomienda dividir el líquido de trabajo en un solo uso para evitar descongelaciones repetidas o cambios de concentración causados por la apertura.
Retención de registros
Hacer un buen registro de preparación, que incluye el nombre del producto estándar, el número de lote, el número del certificado, la calidad / volumen de pesaje, el tipo de disolvente, la concentración de preparación, el gradiente de dilución, la fecha de preparación, el operador, etc., para garantizar la trazabilidad de los datos.