En aplicaciones prácticas, el sistema de imágenes de gel quimioluminiscente está en el campo de la biología molecular, y se utiliza comúnmente para el análisis cuantitativo y cualitativo de biomacromoléculas como adn, ARN y proteínas. Por ejemplo, en los estudios de expresión genética, al detectar fragmentos de ácido nucleico marcados con un sustrato luminoso específico, se puede determinar con precisión el nivel de expresión de los genes y comprender la actividad transcripcional de los genes en diferentes Estados fisiológicos. En la investigación de proteínas, el sistema puede ayudar a los investigadores a determinar el peso molecular, la pureza y el contenido relativo de las proteínas en diferentes muestras, proporcionando una base importante para la investigación funcional de las proteínas y el diagnóstico de enfermedades.
Además, también desempeña un papel indispensable en el proceso de investigación y desarrollo de medicamentos. Puede usarse para monitorear la interacción del medicamento con biomoléculas y evaluar la eficacia y seguridad del medicamento. Al observar los cambios en la luminiscencia de proteínas específicas en las células después del tratamiento farmacológico, los investigadores pueden comprender profundamente el mecanismo de acción del medicamento, seleccionar candidatos farmacéuticos con posibles efectos terapéuticos y acelerar el proceso de desarrollo del medicamento.
Método de calibración del sistema de imágenes de gel quimioluminiscente:
1. calibración de la intensidad luminosa:
- uso de una fuente de luz estándar: colocar una fuente de luz estándar con intensidad de luz conocida en el campo de visión del sistema de imagen, ajustar los parámetros del sistema de imagen (como el tiempo de exposición, la ganancia, etc.) para que el brillo de la fuente de luz estándar en la imagen alcance el valor predeterminado. A continuación, la muestra de Quimioluminiscencia se toma una imagen con este parámetro calibrado para garantizar la precisión de la medición de la intensidad luminosa.
- utilización de sustancias de referencia para la quimioluminiscencia: selección de sustancias de referencia adecuadas para la Quimioluminiscencia cuya intensidad luminosa se ha determinado con precisión. Añadir la sustancia estándar a un gel o solución en una determinada cantidad para que produzca quimioluminiscencia. Al ajustar los parámetros del sistema de imagen, la intensidad de la luminiscencia del material de referencia en la imagen coincide con los valores conocidos, completando así la calibración de la intensidad de la luz.
2. calibración de resolución:
- adoptar la tarjeta de prueba de resolución: utilizar una tarjeta de prueba de resolución especializada para colocarla en el campo de visión del sistema de imágenes, en la que suele haber rayas o patrones de diferentes intervalos. La resolución del sistema se evalúa obteniendo imágenes de la tarjeta de prueba a través del sistema de imágenes para observar el espaciamiento de rayas o los detalles del patrón que se pueden distinguir claramente en la imagen. Si la resolución no cumple con los requisitos, se puede mejorar ajustando la distancia focal de la lente, la apertura y otros parámetros.
- uso de muestras microscópicas: para algunas muestras de Quimioluminiscencia capaces de observar la microestructura, como geles que contienen nanopartículas, etc., se puede utilizar como referencia para la calibración de la resolución. Al tomar imágenes de estas muestras microscópicas y observar las dimensiones estructurales que se pueden distinguir en la imagen, se verifica si la resolución del sistema cumple con los requisitos experimentales.
3. calibración de uniformidad:
- prueba de campo de luz uniforme: crear un campo de Quimioluminiscencia uniforme, como distribuir uniformemente una cantidad adecuada de reactivos de Quimioluminiscencia en gel o solución para que emita una luz relativamente uniforme a lo largo del campo de visión. A continuación, se utiliza un sistema de imágenes para imágenes de este campo de luz uniforme, que evalúa la uniformidad del sistema analizando las diferencias de brillo en diferentes regiones de la imagen. Si se detecta un brillo desigual, se puede mejorar la uniformidad ajustando el sistema de iluminación (como la distribución del brillo de las luces led), el rendimiento óptico de la lente o los algoritmos de procesamiento de imágenes.
- ajuste de contraste: al ajustar los parámetros de contraste del sistema de imagen, las diferencias entre las diferentes regiones de brillo de la imagen son más obvias, mejorando así la uniformidad del sistema. Al mismo tiempo, también se puede utilizar la función de corrección de uniformidad en el software de procesamiento de imágenes para postprocesar la imagen y mejorar aún más la uniformidad.